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行業(yè)動態(tài)

切向流在細(xì)胞灌流培養(yǎng)與產(chǎn)物連續(xù)收獲

添加時(shí)間:2025-04-18 11:11:18   瀏覽次數(shù):305  

細(xì)胞灌流培養(yǎng)與產(chǎn)物連續(xù)收獲

應(yīng)用場景
在哺乳動物細(xì)胞(如CHO細(xì)胞)培養(yǎng)中,通過TFF實(shí)現(xiàn)細(xì)胞截留,延長培養(yǎng)周期并提高產(chǎn)物(如抗體、病毒載體)滴度。

操作流程

  • ?系統(tǒng)配置:使用中空纖維膜包(如Repligen XCell ATF系統(tǒng)),膜孔徑0.2 μm,截留細(xì)胞但允許代謝廢物和產(chǎn)物通過。
  • ?灌流控制:蠕動泵以低流速(如10 mL/min)循環(huán)培養(yǎng)液,維持細(xì)胞密度至1×10^7 cells/mL。
  • ?產(chǎn)物收集:濾液中含有目標(biāo)產(chǎn)物(如抗體),每日取樣監(jiān)測濃度并定期收集。
  • ?營養(yǎng)補(bǔ)充:根據(jù)消耗速率持續(xù)補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基,維持細(xì)胞活力。

優(yōu)勢

  • 培養(yǎng)周期可延長至30天以上,抗體產(chǎn)量提高3~5倍。
  • 避免傳統(tǒng)批次培養(yǎng)的頻繁換液操作,降低污染風(fēng)險(xiǎn)。

注意事項(xiàng)

  • 需優(yōu)化剪切力(泵速)以防止細(xì)胞損傷(CHO細(xì)胞通常耐受剪切力<50 dyn/cm²)。
  • 定期監(jiān)測膜堵塞情況(通過TMP升高判斷),必要時(shí)進(jìn)行反向沖洗(Backflush)。
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